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大腸桿菌表達系統(tǒng)

服務(wù)簡介

大腸桿菌表達系統(tǒng)具有遺傳背景清晰，培養(yǎng)周期短，易于放大生產(chǎn)，抗污染能力強等諸多優(yōu)點，是目前應(yīng)用最為廣泛的表達系統(tǒng)之一。普健生物經(jīng)過十多年的打磨，建立了3H(High through、High efficiency、High quality) 大腸桿菌表達系統(tǒng)，平臺的表達成功率大于95%;獨有的表達純化以及復(fù)性平臺，已成功交付上萬例大腸桿菌表達服務(wù)項目。

服務(wù)優(yōu)勢

1. 普健生物具有十幾年的蛋白表達經(jīng)驗，15臺中大型微生物培養(yǎng)搖床及發(fā)酵設(shè)備、12臺超聲破碎儀、中試型高壓均質(zhì)儀等配套設(shè)備，可以實現(xiàn)高通量，大規(guī)模大腸桿菌表達生產(chǎn)

2. 具有多種大腸桿菌表達載體pET系列、pGEX系列等;多種表達宿主：標準表達菌株、可增強蛋白表達的菌株T7E、表達毒性蛋白的C41、增強蛋白可溶性表達的超低溫菌株Arctic、以及其它經(jīng)過AtaGenix優(yōu)化改造的菌株;通過不同載體和菌株的優(yōu)化組合，可以實現(xiàn)蛋白的高效表達，蛋白表達成功率超過95%

3. 普健生物具有完善的大腸桿菌表達、純化、內(nèi)毒素控制生產(chǎn)線，可以生產(chǎn)高質(zhì)量蛋白，用于細胞活性實驗，動物實驗等，滿足高質(zhì)量的蛋白使用需求

 

服務(wù)流程

案例展示

大腸桿菌表達蛋白A

1.表達體系優(yōu)化：包括宿主菌、誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)時間、誘導(dǎo)劑的濃度及培養(yǎng)基。

宿主菌

誘導(dǎo)溫度

誘導(dǎo)時間

誘導(dǎo)劑

培養(yǎng)基

T7E,BL21,C41,Arctic

30℃/37℃

1h/4h

IPTG

LB/自誘導(dǎo)培養(yǎng)基

 

蛋白A的搖瓶表達量為8 mg/L, 隨后進行了發(fā)酵條件的優(yōu)化，包括培養(yǎng)基成分的優(yōu)化、分批及補料的測試，70 L 分批發(fā)酵的表達量為60 mg/L。


2.3C酶去除蛋白MAT標簽，具體結(jié)果如圖3、圖4所示

優(yōu)勢服務(wù)