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哺乳動物蛋白表達瞬時轉染與穩(wěn)定轉染之間有哪些不同?

發(fā)表時間:2023-10-25 訪問次數:800

  我們在利用哺乳動物表達蛋白時,因為其能夠更好的促使蛋白進行正確的折疊和修飾功能實現(xiàn),所得所得蛋白更加接近天然蛋白的狀態(tài),所以,利用其制備的藥品在效果方面更好。我們知道,在利用哺乳動物蛋白表達系統(tǒng)時,常常會通過兩種方式:瞬時轉染和穩(wěn)定轉染。那么,這兩種方法有哪些方面的不同呢?

  瞬時轉染和穩(wěn)定轉染之間有哪些不同?

  其實就操作而言,瞬時轉染和穩(wěn)定轉染大體相同,都是將目的蛋白轉染到哺乳動物體內,利用其蛋白表達過程表達目的蛋白。但是,瞬時轉染并沒有將目的蛋白轉染到細胞染色體上,而是轉染至游離的載體上,這樣能夠讓我們在短時間內獲得大量目的蛋白。這個方法只能短時間內獲得蛋白,但是隨著細胞的繁殖,會導致外源基因的丟失,最終無法生產目的蛋白;

  而穩(wěn)定轉染則是將目的蛋白轉染到細胞染色體上,而后隨著原細胞蛋白的表達而表達。這個方法不會造成目的基因的丟失,能夠長期穩(wěn)定地進行目的蛋白表達;

  瞬時轉染和穩(wěn)定轉染在操作上存在哪些方面的不同?

  1、瞬時轉染選擇的質粒不需要有抗性,而穩(wěn)定轉染所需質粒需要有一定的抗性來進行后期的克隆株篩選;

  2、瞬時轉染的操作相對簡單,只要在質粒構建好后,通過細胞復蘇、轉染、培養(yǎng)、蛋白純化等一系列的操作后即可獲得目的蛋白。而穩(wěn)定轉染則需要構建好質粒線性化,導入細胞,而后將轉染后的質粒與細胞進行融合,再通過篩選、培養(yǎng)等一系列的步驟后再構建相應的穩(wěn)定細胞系(穩(wěn)定轉染可以實現(xiàn)長期穩(wěn)定地生產蛋白);

  總的來說,我們在進行哺乳動物蛋白表達時,完全可以根據需求來進行瞬時轉染或穩(wěn)定轉染,當短期需要蛋白時,選擇瞬時轉染,長期需要蛋白時,選擇穩(wěn)定轉染。當然了,具體選擇也需要結合相關成本和技術支持來選擇。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供哺乳動物蛋白表達服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。