前面我們和大家簡(jiǎn)單介紹了一下有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株篩選的步驟，讓大家對(duì)其有了一定的了解，那么，是不是就可以直接開始實(shí)驗(yàn)了呢?答案是否定的。在穩(wěn)定細(xì)胞株篩選的過(guò)程中不僅有很多細(xì)節(jié)操作問(wèn)題，還有很多注意事項(xiàng)，稍不注意，就可能造成實(shí)驗(yàn)的失敗。有鑒于此，普健生物今天在這里和大家具體聊聊其注意事項(xiàng)問(wèn)題。

　　1、篩選前的準(zhǔn)備

　　篩選前我們需要確定藥物篩選的相關(guān)濃度。對(duì)于不同的細(xì)胞來(lái)說(shuō)，其對(duì)藥物的敏感度是各不相同的，需要在細(xì)胞能夠承受的濃度范圍內(nèi)，否則，很容易造成細(xì)胞表達(dá)低甚至死亡的情況;

　　2、篩選過(guò)程中的注意事項(xiàng)

　　篩選時(shí)間：一般在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)后進(jìn)行，而對(duì)于慢病毒來(lái)說(shuō)加藥時(shí)間一般在72小時(shí);

　　空白對(duì)照：在加藥篩選時(shí)，需要提前設(shè)置好空白對(duì)照，全程對(duì)比細(xì)胞的變化情況;

　　換液操作：當(dāng)細(xì)胞死亡達(dá)到一定的程度后，需要及時(shí)換液，以避免有害物質(zhì)造成細(xì)胞的死亡;

　　3、克隆篩選過(guò)程中的注意事項(xiàng)

　　在進(jìn)行單克隆篩選的時(shí)候，如果有熒光標(biāo)記，則盡量選擇那些帶有熒光較強(qiáng)的細(xì)胞;如果質(zhì)粒不帶熒光標(biāo)記，則只能進(jìn)行盲挑。

　　當(dāng)然了，無(wú)論是否帶有熒光標(biāo)記，都需要對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證，而且盡量多挑幾個(gè)來(lái)進(jìn)行克隆，以保證成功率;

　　當(dāng)然了，如上所述也只是注意事項(xiàng)中的一部分，對(duì)于不同實(shí)驗(yàn)的不同需求來(lái)說(shuō)，注意事項(xiàng)也是各種各樣的，比如基礎(chǔ)的溫度、PH值等等，這些都需要提前了解好，而后根據(jù)相應(yīng)的需求來(lái)配置相應(yīng)的環(huán)境，這樣才能有效提升實(shí)驗(yàn)的成功率。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細(xì)胞株篩選服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。