在全球生物醫(yī)藥領(lǐng)域迎來創(chuàng)新浪潮的五月,普健生物持續(xù)賦能前沿科研攻關(guān),多項由其提供關(guān)鍵技術(shù)支持的突破性成果,相繼登陸《PNAS》《Sciences》《Plant Communications》等國際權(quán)威期刊。這些覆蓋作物抗病機(jī)制、病毒行為調(diào)控、藥用植物代謝工程、新冠抗體開發(fā)、HSV疫苗設(shè)計及水禽免疫通路的跨學(xué)科研究,揭示了生命科學(xué)的精妙調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。讓我們共同見證五月科研星圖中的璀璨亮點,探索普健生物如何以技術(shù)之力驅(qū)動多領(lǐng)域突破吧!
01 影響因子:20.1
標(biāo)題:Simvastatin overcomes the pPCK1-pLDHA-SPRINGlac axis-mediated ferroptosis and chemo-immunotherapy resistance in AKT-hyperactivated intrahepatic cholangiocarcinoma
期刊:CANCER COMMUNICATIONS
作者單位:華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)院
膽內(nèi)膽管癌(ICC)是一種高度侵襲性癌癥,常伴有AKT信號高活化,臨床治療中對化療和免疫治療響應(yīng)率較低。本研究發(fā)現(xiàn),AKT高活化通過促進(jìn)磷酸化的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(pPCK1)上調(diào)糖酵解和甲羥戊酸(MVA)途徑,誘導(dǎo)乳酸脫氫酶A(pLDHA)和SPRING乳?;纬蓀PCK1-pLDHA-SPRINGlac代謝軸,從而增強(qiáng)還原型輔酶Q10和甲萘醌的合成,抑制鐵死亡,導(dǎo)致化療-免疫治療(CIT)耐藥。研究顯示,通過抑制PCK1磷酸化或使用辛伐他?。⊿imvastatin)阻斷MVA通路,可逆轉(zhuǎn)這種耐藥性,提高ICC對CIT的反應(yīng)率。該機(jī)制為通過激活鐵死亡增強(qiáng)ICC治療效果提供了新策略。
AtaGenix為本研究提供了pPCK1(pS90)和LDHA(pT248)磷酸化特異性抗體定制服務(wù),用于關(guān)鍵信號通路的功能驗證。這些抗體在免疫印跡、IHC及流式分析中成功揭示pPCK1-pLDHA軸的激活狀態(tài),為進(jìn)一步確認(rèn)其驅(qū)動SPRING乳?;?、介導(dǎo)鐵死亡耐受提供了重要實驗依據(jù)。
02 影響因子:9.4
標(biāo)題:The F-box protein CHALK10 mediates SEMIDWARF-1 ubiquitination and degradation to negatively regulate grain chalkiness in rice
期刊:PLANT COMMUNICATIONS
作者單位:中國水稻研究所水稻生物學(xué)國家重點實驗室
稻米品質(zhì)的重要指標(biāo)之一是“堊白度”,即米粒中不透明白斑的比例,會顯著影響口感和商品價值。本研究發(fā)現(xiàn)F-box蛋白CHALK10在調(diào)控稻米堊白形成中起關(guān)鍵負(fù)調(diào)控作用。CHALK10通過與赤霉素生物合成酶SEMIDWARF-1(SD1)互作,促進(jìn)其泛素化并經(jīng)26S蛋白酶體降解,從而抑制赤霉素積累,進(jìn)而調(diào)控淀粉合成及降解相關(guān)基因的表達(dá),維持米粒正常淀粉含量和結(jié)構(gòu)。chalk10突變體SD1積累、赤霉素水平升高,導(dǎo)致α-淀粉酶活性增強(qiáng)、可代謝糖積累、淀粉減少,最終引發(fā)米粒堊白增加。該研究首次揭示CHALK10-SD1-GA信號模塊在稻米堊白形成中的作用機(jī)制,為優(yōu)質(zhì)稻米育種提供了新靶點。
AtaGenix為本研究定制了CHALK10多克隆兔抗,靶向其85-245位氨基酸片段。該抗體被廣泛應(yīng)用于蛋白表達(dá)驗證及免疫印跡實驗中,幫助作者精確分析CHALK10在不同組織及突變背景下的表達(dá)情況,并驗證其在降解SD1過程中的作用。
03 影響因子:9.4
標(biāo)題:A symbiotic gene stimulates aggressive behavior favoring the survival of parasitized caterpillars
期刊:PNAS
作者單位:浙江省農(nóng)作物病蟲害生物防治工程技術(shù)研究中心
在自然界中,饑餓常誘發(fā)動物的攻擊性和同類相食行為。本研究聚焦十字花科害蟲——菜青蟲(Plutella xylostella),發(fā)現(xiàn)其在被寄生蜂(Cotesia vestalis)寄生后,饑餓狀態(tài)下的攻擊性顯著增強(qiáng)。這種攻擊性由寄生蜂體內(nèi)內(nèi)源化病毒CvBV攜帶的一種基因Assailant(CvBV_19-7)介導(dǎo)。該基因通過上調(diào)神經(jīng)遞質(zhì)章魚胺(octopamine)的合成,提升了宿主神經(jīng)系統(tǒng)中關(guān)鍵酶PxTβH的表達(dá),從而增加了攻擊性,改善了寄生個體在資源有限時的生存率。這項研究揭示了寄生蜂如何利用病毒調(diào)控宿主行為,以提升其后代在惡劣環(huán)境下的存活優(yōu)勢。
AtaGenix為本研究提供了兩種關(guān)鍵抗體的定制服務(wù):一是針對病毒因子Assailant(CvBV_19-7)蛋白的兔多克隆抗體,二是針對宿主酶PxTβH的鼠源抗體,均用于免疫組化和免疫印跡實驗。這些抗體幫助作者精確定位Assailant與PxTβH在菜青蟲神經(jīng)系統(tǒng)中的共表達(dá)情況,并驗證Assailant通過調(diào)控OA合成通路誘導(dǎo)宿主攻擊性行為。
04 影響因子:4.9
標(biāo)題:Genome-Wide Identification of UGT Gene Family and Functional Analysis of PgUGT29 in Platycodon grandiflorus
期刊:Molecular Sciences
作者單位:安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院
桔梗(Platycodon grandiflorus)是一種藥食兩用植物,其主要活性成分為五環(huán)三萜類皂苷,其中桔梗皂苷D(PD)和其糖基化產(chǎn)物PD3在抗炎、抗腫瘤等方面具有顯著藥理作用。該研究在全基因組層面系統(tǒng)鑒定了107個UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶(UGT)家族成員,并結(jié)合生物信息學(xué)和表達(dá)分析篩選出PgUGT29和PgUGT72作為潛在的PD糖基化酶。體外酶活驗證顯示,PgUGT29可催化PD在C3位與UDP-Glc結(jié)合生成PD3,而PgUGT72無此活性。通過分子對接分析,PgUGT29中T145、D392、Q393和N396被鑒定為與底物結(jié)合的關(guān)鍵氨基酸殘基。研究不僅揭示了PgUGT29在皂苷合成中的關(guān)鍵作用,也為后續(xù)桔梗藥效成分的代謝工程改造奠定基礎(chǔ)。
AtaGenix參與了PgUGT29與PgUGT72基因的合成與克隆,并構(gòu)建了用于表達(dá)的重組載體,協(xié)助實現(xiàn)蛋白質(zhì)在大腸桿菌中的異源表達(dá)。該服務(wù)為后續(xù)PgUGT29酶活實驗及蛋白質(zhì)純化提供了關(guān)鍵材料保障。
05 影響因子:4.5
標(biāo)題:Herpes simplex virus 1 fusion glycoprotein B H516P prefusion mutation had no effect on vaccine immunogenicity
期刊:Vaccine
作者單位:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)生物研究所
單純皰疹病毒(HSV)全球流行,其復(fù)雜的膜融合機(jī)制導(dǎo)致目前尚無獲批疫苗。本研究旨在探討HSV-1融合糖蛋白B(gB)的H516P預(yù)融合突變對疫苗免疫原性的影響,并比較不同佐劑(QS-21與CpG ODNs 聯(lián)用、明礬)及疫苗類型(亞單位疫苗、mRNA 疫苗)的效果。免疫BALB/c小鼠后發(fā)現(xiàn),gB H516P突變對體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答無顯著影響,但QS-21與CpG聯(lián)用的亞單位疫苗相比明礬佐劑顯著增強(qiáng)細(xì)胞免疫,且所有疫苗組小鼠在 HSV-1 攻擊后均未死亡或出現(xiàn)明顯體重下降,顯示出保護(hù)效果。
AtaGenix參與了疫苗研發(fā)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié):將優(yōu)化的gB蛋白及gB H516P突變體基因序列克隆至 pBlueScript II SK (+) 和 pATX2 載體,并在C端添加Strep標(biāo)簽以便純化。利用中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞表達(dá)目標(biāo)蛋白,并通過鎳柱純化獲得高純度抗原。該服務(wù)為后續(xù)疫苗制備提供了關(guān)鍵原材料,確保了抗原的正確表達(dá)和純化,為評估疫苗免疫原性及保護(hù)效力奠定了基礎(chǔ),推動了 HSV-1 疫苗從基因設(shè)計到實驗驗證的進(jìn)程。
06 影響因子:3.8
標(biāo)題:Epitope mapping of SARS-CoV-2 Spike protein using naturallyacquired immune responses to develop monoclonal antibodies
期刊:scientific reports
作者單位:CIBERES呼吸疾病網(wǎng)絡(luò)生物醫(yī)學(xué)研究中心
本研究針對SARS-CoV-2脆弱人群(如免疫缺陷者)對疫苗應(yīng)答不足的問題,開發(fā)了一種結(jié)合計算預(yù)測與實驗驗證的抗體開發(fā)策略。研究團(tuán)隊利用自研生物信息學(xué)流程Brewpitopes預(yù)測了SARS-CoV-2刺突蛋白的25個B細(xì)胞表位,并通過509例COVID-19康復(fù)患者血清/血漿樣本(含不同嚴(yán)重程度分型)進(jìn)行Luminex多重免疫分析篩選。結(jié)果顯示,3個表位(肽段11、25和3)表現(xiàn)出最高IgG反應(yīng)性,其中位于RBD-NTD結(jié)構(gòu)域間的肽段11和25被選為單克隆抗體(mAb)開發(fā)靶點。利用噬菌體展示技術(shù),成功制備出靶向這兩個表位的mAbs(mAb11和mAb25)。表面等離子共振(SPR)分析證實,mAb11對SARS-CoV-2 S1蛋白的親和力($K_D$=6.49–14.2 nM)與商用中和抗體相當(dāng),且表位在主要變異株中高度保守。該流程為開發(fā)非RBD靶向的治療性抗體提供了新思路。
AtaGenix通過噬菌體展示技術(shù)參與單克隆抗體制備:將篩選出的3個高免疫原性表位偶聯(lián)至BSA等載體蛋白,利用人類免疫scFv庫LiAb-SFCOVID19™(含1.19×10¹?變體)進(jìn)行淘選,經(jīng)ELISA篩選陽性克隆后,通過XtenCHO™細(xì)胞系重組表達(dá)抗體并純化。其技術(shù)支持確保mAbs的特異性和功能活性,為后續(xù)表面等離子體共振(SPR)驗證抗體與表位及 S 蛋白的結(jié)合親和力提供了關(guān)鍵材料。
07 影響因子:3.6
標(biāo)題:Mallard ILF2 negatively regulates type I IFN production through autophagy-lysosome-dependent degradation of IRF7
期刊:J Immunol
作者單位:中國科學(xué)院水生生物研究所淡水生態(tài)與生物技術(shù)國家重點實驗室
白細(xì)胞介素增強(qiáng)結(jié)合因子2(ILF2)在病毒感染中兼具正負(fù)調(diào)控作用,但其在鴨坦布蘇病毒(DTMUV)感染中的機(jī)制尚不明確。本研究發(fā)現(xiàn),綠頭鴨ILF2通過自噬溶酶體途徑降解IRF7,從而抑制I型干擾素(IFN)產(chǎn)生,促進(jìn)病毒復(fù)制。過表達(dá)ILF2抑制poly I:C和DTMUV誘導(dǎo)的IFN-α、IFN-β、IFN-κ-like生成,而敲低ILF2則增強(qiáng)IFN表達(dá)并抑制病毒感染。機(jī)制上,ILF2的鋅指相關(guān)結(jié)構(gòu)域(DZF)與IRF7的IRF結(jié)合域(IAD)直接結(jié)合,招募自噬關(guān)鍵分子Beclin1,誘導(dǎo)IRF7的自噬性降解。抑制自噬溶酶體途徑(如 3-MA 處理)可逆轉(zhuǎn)IRF7降解。本研究揭示了ILF2通過調(diào)控IRF7降解抑制宿主抗病毒免疫的新機(jī)制。
AtaGenix在研究中提供制備了IRF7 303-476 aa肽段的兔多抗,用于免疫印跡和免疫共沉淀實驗,驗證ILF2與IRF7的相互作用及IRF7的蛋白表達(dá)變化。高質(zhì)量的抗體確保了實驗中蛋白檢測的準(zhǔn)確性,為闡明ILF2通過自噬途徑降解IRF7的機(jī)制提供了關(guān)鍵工具。
普健生物文獻(xiàn)獎勵活動持續(xù)進(jìn)行中
普健生物的技術(shù)助力科研人員突破諸多研究瓶頸,取得了一系列重要發(fā)現(xiàn)。小編將堅持每月為大家?guī)磉@樣的文獻(xiàn)匯總,持續(xù)聚焦普健生物相關(guān)的前沿研究。也希望大家能通過這個系列,更加深入全面地認(rèn)識普健生物的無限潛力和廣泛影響力。截至目前,已有400余篇文獻(xiàn)引用了普健生物的一站式蛋白抗體開發(fā)技術(shù)服務(wù)。展望未來,普健生物將繼續(xù)全力支持科研工作,推動技術(shù)創(chuàng)新與突破。為感謝大家的持續(xù)支持,普健生物將一如既往地提供高質(zhì)量的服務(wù),我們的文獻(xiàn)獎勵活動也將長期有效。凡是在發(fā)表的論文中引用普健生物的技術(shù)服務(wù)并標(biāo)注:
[中文:普健生物(武漢)科技有限公司;
英文:AtaGenix Laboratories Co., Ltd.(Wuhan), Wuhan, PR China]
均可獲得專屬獎勵。期待您的參與,共同推進(jìn)科研事業(yè)的發(fā)展。
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